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單側腎靜脈結扎法腎小管間質纖維化模型

(1)復制方法  體重200～250g大鼠，經腹腔按0.1ml/kg體重的劑量注射8.5％水合氯醛麻醉，動物行仰臥固定，常規消毒腹部皮膚并取毛；沿腹中線作手術切口，依次切開皮膚和肌肉，游離左側腎臟，分離左腎靜脈，用4-0號手術縫線結扎，然后常規縫合肌肉和皮膚，關閉腹腔。術后動物常規單籠飼養觀察，自由飲水及進食。于術后第5、10、15、20及25日動物麻醉后右股動脈放血處死，分離血清作血肌酐(SCr)含量測定；處死前1d在禁食不禁水的條件下，收集大鼠24h尿液測尿規。取左腎組織標本經10％甲醛固定后，作常規組織切片，光鏡下觀察。

(2)模型特點  術后第5日，模型動物出現微量鏡下血尿(紅細胞5～10個/HPF)及微量蛋白尿(+)。隨時間延長，尿常規恢復正常。SCr含量自始至終未見異常。術后第5日，外觀左腎呈紫紅色，明顯腫脹；隨著時間延長(第10、15、20、25日)，左腎逐漸呈灰紅色至灰白色，體積縮小，質地變硬；右腎體積略增，但無其他異常。鏡下病理組織學觀察顯示，術后第5日，模型動物腎小球淤血，腎間質彌漫性淤血、水腫及灶狀出血，腎小管擴張，管腔內可見管型；術后第14日，腎小球淤血、基底膜皺縮，腎小管上皮細胞彌漫性變性、萎縮、管腔擴張，腎間質淤血、水腫減輕，可見大量淋巴細胞及單核細胞彌漫性浸潤。術后第15～25日，與第10日的病變相似。腎小球發生缺血性改變，腎小管顯著萎縮，甚至出現腎小管消失，腎間質淋巴細胞、單核細胞灶狀浸潤伴明顯纖維化。右腎組織形態未見明顯組織學變化。模型制作方法簡便，成本低廉，造模周期短，成功率高，病變穩定。

(3)比較醫學  以往的研究表明，各種原因導致的慢性腎功能衰竭(CRF)與腎小管間質纖維化(tubulointerstitial fibrosis, TIF)的關系，較CRF與腎小球損傷的關系更為密切。有關腎小管間質纖維化(TIF)的研究已成為近年來腎臟疾病研究關注的熱點。TIF是臨床上多種慢性非腫瘤性腎臟疾病長期遷延，終導致患者出現CRF的主要病理基礎。它以腎小管損傷、腎間質炎癥細胞浸潤、纖維化為特征。由于患者發生腎間質纖維化的臨床病程漫長，且病因復雜，再加上取材的局限性，對TIF病理過程進行動態研究比較困難。建立符合臨床TIF實際且典型而穩定的動物模型，對深入研究腎小管間質纖維化的病理生理機制意義重大。目前常用包括藥物誘導、免疫介導、腎次全切除、單側輸尿管結扎、放射損傷、感染、慶大霉素、腺嘌呤等多種方法來制備 TIF動物模型，但這些模型均有各自的局限性。其中藥物誘導如環孢菌素腎炎、阿霉素腎炎等方法，雖然操作簡單且成功率高，但成本高、實驗周期長、間質變化較輕。腎全切除可以造成TIF病變，但操作復雜，對動物創傷較大。免疫介導的腎炎模型通過延長致病周期雖然可以得到TIF病變，但難以獲得穩定的結果。腺嘌呤致纖維化模型病變穩定，但是需要每天按照動物的體重配藥灌胃，操作繁瑣，周期也較長。慶大霉素腎小管損傷模型以腎小管上皮急性壞死再生為主，間質纖維化不明顯。單側輸尿管結扎模型通過尿液潴留壓迫損傷腎組織導致間質纖維化，時間一般控制在15d左右，如果延長時間，腎實質受擠壓變的過薄，但是第15日時，間質纖維化病變不很明顯。采用腎靜脈單側結扎方法建立的大鼠TIF模型，屬于腎缺血導致的腎小管損傷和腎間質增生，其腎臟產生的病變與臨床上人TIF的病變極為相似，對探討TIF的發病機制研究具有較好的應用價值。