微生物耐熱大腸菌群培養基成品試劑使用說明書
方法:MFC 培養基濾膜法
方法來源:GB/T5750-2006
應用范圍:飲用水、出廠水、水源水、廢水、泳池水等
測定步驟:
◆注意:為防止收到空氣、輔助實驗器皿、操作人員等環節帶入細菌污染,請在無菌環境下 操作并做好各環節的滅菌工作。
1 、將濾膜放入沸水中 煮沸滅菌 3 次,每次 15 分鐘。每次均需換 水。滅菌后備用。
2、將試劑放入沸騰的水 中(鍋里放有鐵架) , 將培養基煮至融化完全 后,取出備用。
3、在酒精燈上將無菌 培養皿取出。
4、待步驟 1 培養基冷卻 至 50℃左右,在酒精燈 上方,將培養基導入培 養皿中。
5 、立即將培養皿平放 于 臺面上 ,旋搖培養 皿 ,將培養基放至凝 固,備用。
6 、用點燃的酒精棉球 火焰將杯蓋、濾杯、濾 膜底座和鑷子滅菌。
7、用滅菌的鑷子夾取一 片步驟 1 的無菌濾膜, 夾住邊緣,平貼到濾膜 底座上。
9 、取下濾杯,用滅菌 的鑷子取下濾膜。
8 、安裝好抽濾裝置,倒 入 100mL 混勻的水樣并 抽濾,水干后再抽 5 秒即 可停止
9 、取下濾杯,用滅菌 的鑷子取下濾膜。
10、將濾膜平鋪于已經凝固的步驟 5 的培養基上,細菌截留面朝上,避免 出現氣泡。翻轉培養皿,置于44.5℃ 恒溫培養箱內培養 24 小時±2 小時, 記錄藍色菌落數。
提示:若特征菌落數過多,則將水樣稀釋適當倍數,經過稀釋的水樣,最終結果需乘以 稀釋倍數。水樣稀釋、過濾及接種操作均為無菌操作。
提示:若需做一平行樣,只需將平行的濾膜鋪于同一塊培養皿中即可實現。
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