服務說明
研究蛋白質首要的步驟是將目的蛋白從復雜的大分子混合物中分離純化出來,得到高純度具有生物學活性的目的物。因此,高效的純化技術和手段是蛋白質研究的重要基礎和關鍵之一。
蛋白質是包括人類在內的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質基礎之一。生物體的生長、發育、遺傳和繁殖等一切生命活動都離不開蛋白質。 里來生物技術優勢
(1)高效蛋白提取液進行高質量蛋白的提取,同時高效的蛋白酶抑制劑有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用;
(2)里來生物擁有多年的Western Blot檢測經驗,為客戶提供專業的技術服務;
(3)里來生物為客戶設置預實驗,根據客戶樣品具體情況摸索上樣量和抗體稀釋度。
服務項目 | 規格 | 價格 |
骨/脂肪總蛋白提取 | 元/例 | ¥60.00 |
核/膜/質/漿蛋白提取 | 元/例 | ¥60.00 |
里來生物技術優勢:
(1)高效蛋白提取液進行高質量蛋白的提取,同時高效的蛋白酶抑制劑有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用;
(2)里來生物擁有多年的Western Blot檢測經驗,為客戶提供專業的技術服務;
(3)里來生物為客戶設置預實驗,根據客戶樣品具體情況摸索上樣量和抗體稀釋度。
實驗樣品要求:
(1)細胞不少于5×106個;
(2)組織樣品不少于50mg;
(3)總蛋白濃度不低于 2μg/μl(至少50μl);
注意事項:
(1)每張膜上做一種目的蛋白和相應的內參蛋白。每張膜上可以做8個樣品。一般狀況下,2周即可完成實驗。如遇特殊情況,如一抗不好,蛋白濃度低或蛋白特殊,如分子量大等,周期會有所延長。
(2)Western Blot細胞蛋白樣本的準備及運輸:去掉培養液,用PBS洗一次后,加入少量PBS,用細胞刮將細胞刮下,用1ml槍吸取細胞易于1.5ml EP管中,快速離心(升至轉速就可stop)去除上清后,可按下面兩種方法運輸:A.細胞干運輸:將細胞干放入液氮速凍,-80℃保存; 如需長途過夜運輸,建議干冰運輸;如當天送達樣本,可用液氮或者-80℃冰袋運輸;B.細胞裂解液運輸:加入一定量的胞裂解液后即可冷藏運輸(冰袋或者冰盒)。如需檢測磷酸化蛋白,建議裂解液中加入終濃度1mM的NaF,NaF可抑制磷酸酶活性,保護蛋白磷酸化水平。如果加入裂解液后提取蛋白,則置于冰上裂解1 h,12000rpm離心10 min后取上清,即為蛋白樣本。蛋白樣本可-20度冷藏運輸(建議快遞寄送用干冰或者足量-80度冰袋),保存需要-80℃。
(3)蛋白樣本運輸:蛋白樣本需要經過濃度測定,再進行變性,變性時先加入Sample buffer,再95℃ 10 min,Sample buffer可防止變性導致的蛋白沉淀析出。變性的蛋白可直接冷藏運輸,-20℃穩定保存。