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Halo Pull Down(蛋白之間的互作研究)

2025-05-29

產      地:
暫無
所在地區:
河北保定市
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Halo Pull Down(蛋白之間的互作研究)


Halo Pull Down技術是將Halo標簽的融合蛋白固相化到磁珠上,與細胞總蛋白進行孵育,鑒定與之相互作用的蛋白。該方法可以鑒定與已知蛋白相互作用的未知蛋白,也可以鑒定兩個已知蛋白間是否存在相互作用。

我們的Halo PullDown技術服務利用無細胞蛋白表達系統來表達Halo標簽的融合蛋白(誘餌蛋白),節省時間,蛋白表達載體構建成功后,不需要轉化和鑒定,可直接表達目的蛋白。 蛋白表達成功后進行純化,將純化后的蛋白與細胞裂解液孵育一段時間后,洗去上清蛋白,將與目的蛋白結合的蛋白洗脫,并進行質譜檢測。


技術流程

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步驟內容交付內容周期
載體構建
  • 客戶提供目的蛋白對應的CDS的序列或質粒,

  • 克隆至合適的表達載體,

  • 質粒測序,

  • 質粒制備。

測序結果1-2周
無細胞表達+純化
  • 用小麥芽胚蛋白表達體系進行蛋白表達,

  • 蛋白表達評估 (Western Blot) 。

表達評估報告1周
Pull Down
  • 細胞裂解,

  • 目的蛋白和總蛋白孵育,

  • 洗脫與目的蛋白結合的蛋白。

銀染結果1周
質譜檢測
  • 將洗脫的蛋白進行質譜鑒定。

質譜結果2周



客戶提供材料交付結果

新鮮樣本(組織或者細胞):細胞數量>2.7ⅹ107

組織樣本>3g

載體測序結果

實驗過程圖

質譜結果
















我們可為您提供Halo Pull Down(蛋白之間的互作研究)技術服務,歡迎咨詢!


更多技術服務:

DNA親和純化測序(DAP-seq)

在全基因組水平上鑒定轉錄因子的結合位點,預測轉錄因子潛在的靶基因。

DAP-seq 技術的出現,使轉錄因子結合位點的研究不再局限于生物物種,不再受抗體質量的限制,進一步拓展并加深了生命科學領域研究的廣度和深度。

DAP-seq與RNA-seq聯合分析

分析轉錄因子的靶基因在RNA-seq數據中的表達變化,深入挖掘DAP-seq和RNA-seq測序數據,增加轉錄組測序的分析深度。

酵母單雜交技術 (Yeast One-Hybrid)

確定已知 DNA 和蛋白質之間是否存在相互作用。

篩選結合于目標順式作用元件或其他短 DNA 序列的新蛋白。

鑒定蛋白結合 DNA 的結構域,精準定位與DNA 結合的蛋白序列。

重組蛋白表達

有大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞、哺乳動物細胞4種蛋白表達系統可供選擇。


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