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如何正確的使用紙色譜法分析樣品
2022年08月23日 17:16:36
來源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：6941
紙色譜法又稱紙層析法，是用紙作為載體，通過分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析樣品成分的色譜法，具有微量、快速、高效和敏捷度高等特點(diǎn)。從原理上來說，紙色譜涉及分配、吸附和離子交換等機(jī)理，相對(duì)復(fù)雜，但是分配機(jī)理起主要作用，因此紙色譜法屬于分配色譜。
【化工儀器網(wǎng) 行業(yè)百態(tài)】紙色譜法又稱紙層析法，是用紙作為載體，通過分裂系的在同一介質(zhì)中分散速度不同來分析樣品成分的色譜法，具有微量、快速、高效和敏捷度高等特點(diǎn)。從原理上來說，紙色譜涉及分配、吸附和離子交換等機(jī)理，相對(duì)復(fù)雜，但是分配機(jī)理起主要作用，因此紙色譜法屬于分配色譜。
由于紙色譜法適用于多官能團(tuán)或高極性的親水化合物如醇類、羥基酸、氨基酸、糖類和黃酮類等化合物的分離檢驗(yàn)，因此在巖礦分析與鑒定以及藥品檢測(cè)領(lǐng)域有較為廣泛的應(yīng)用。
其中，用于藥品檢測(cè)時(shí)根據(jù)檢測(cè)內(nèi)容的不同，采取的措施也不同。具體來說，當(dāng)采用紙色譜法進(jìn)行藥品鑒別時(shí)，供試品在色譜圖中所顯主斑點(diǎn)的位置與顏色(或熒光)，應(yīng)與對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在色譜圖中所顯主斑點(diǎn)相同；進(jìn)行藥品純度檢查時(shí)，取一定量的供試品，經(jīng)展開后，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，檢視其所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)和呈色深度(或熒光強(qiáng)度)；進(jìn)行藥品含量測(cè)定時(shí)，將待測(cè)色譜斑點(diǎn)剪下經(jīng)洗脫后，再用適宜的方法測(cè)定。
紙色譜法的準(zhǔn)備工作
紙色譜法根據(jù)操作方法的不同又可以分為上行法與下行法，不過用到的儀器和材料大同小異。
進(jìn)行紙色譜分析前應(yīng)準(zhǔn)備好展開容器(通常為圓形或長方形玻璃缸，缸上具有磨口玻璃蓋，應(yīng)能密閉)、點(diǎn)樣器、色譜濾紙。其中點(diǎn)樣器需要保證能使點(diǎn)樣位置正確、集中，一般采用平口微量注射器或定量毛細(xì)管(無毛刺)；而色譜濾紙需做到質(zhì)地均勻平整，具有一定機(jī)械強(qiáng)度不含影響展開效果的雜質(zhì)，也不會(huì)與所用顯色劑起作用，以免影響分離和鑒別效果，必要時(shí)可進(jìn)行處理后再用。
而在進(jìn)行上行法時(shí)，需要在展開容器蓋上的孔中加塞，塞中插入玻璃懸鉤，以便將點(diǎn)樣后的色譜濾紙掛在鉤上，并除去溶劑槽和支架，并且使用的色譜濾紙長控制在 25cm左右，寬度則按需要而定，必要時(shí)可將色譜濾紙卷成筒形，點(diǎn)樣基線距底邊約 2.5cm。
進(jìn)行下行法時(shí)，需要在支架架起展開容器，并用玻棒壓住色譜濾紙，同時(shí)，色譜紙按纖維長絲方向切成適當(dāng)大小的紙條，使色譜濾紙上端能足夠浸入溶劑槽內(nèi)的展開劑中，并使點(diǎn)樣基線能在溶劑槽側(cè)的玻璃支持棒下數(shù)厘米處，必要時(shí)，可在色譜濾紙下端切成鋸齒形便于展開劑向下移動(dòng)。
紙色譜法的操作方法
進(jìn)行紙色譜法時(shí)，應(yīng)先將供試品溶解于適宜的溶劑中制成一定濃度的溶液，然后用微量注射器或定量毛細(xì)管吸取溶液，點(diǎn)于點(diǎn)樣基線上，一次點(diǎn)樣量不超過 10µl。
如果采用的是上行法，則應(yīng)該在展開容器中加入適量展開劑，靜置至展開劑蒸氣飽和后，再下降懸鉤，使色譜濾紙浸入展開劑約 1cm，展開劑即經(jīng)毛細(xì)作用沿色譜濾紙上升，除另有規(guī)定外，一般展開至約 15cm 后，取出晾干，按規(guī)定方法檢視。展開可以單向展開，即向一個(gè)方向進(jìn)行；也可進(jìn)行雙向展開，即先向一個(gè)方向展開、取出，待展開劑完全揮發(fā)后，將濾紙轉(zhuǎn)動(dòng) 90°，再用原展開劑或另一種展開劑進(jìn)行展開。亦可多次展開和連續(xù)展開等。
如果采用下行法，則應(yīng)該將點(diǎn)樣后的色譜濾紙的點(diǎn)樣端放在溶劑槽內(nèi)并用玻棒壓住，使色譜濾紙通過槽側(cè)玻璃支持棒自然下垂，點(diǎn)樣基線在壓紙棒下數(shù)厘米處。展開前，展開缸內(nèi)用各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑的蒸氣使之飽和，一般可在展開缸底部放一裝有規(guī)定溶劑的平皿，或?qū)⒈灰?guī)定溶劑潤濕的濾紙條附著在展開缸內(nèi)壁上，放置一定時(shí)間，待溶劑揮發(fā)使缸內(nèi)充滿飽和蒸氣。然后小心添加展開劑至溶劑槽內(nèi)，使色譜濾紙的上端浸沒在槽內(nèi)的展開劑中。展開劑即經(jīng)毛細(xì)作用沿色譜濾紙移動(dòng)進(jìn)行展開，展開過程中避免色譜濾紙受強(qiáng)光照射，展開至規(guī)定的距離后，取出色譜濾紙，標(biāo)明展開劑前沿位置，待展開劑揮散后，按規(guī)定方法檢測(cè)色譜斑點(diǎn)。
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