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1、接通電源，開啟電源開關。
2、把CO2氣體減壓閥出氣壓力調到0.06MPA，大不能超過0.1MPA。
3、溫度、CO2濃度設定：按“MODE"選“SET"是設定所需要控制的CO2濃度和溫度的值，選“CAL"是校準（如“TEMCAL"是溫度校準，“CO2CAL"是CO2零點校準），二者有本質區別，不能混肴；溫度上升到所有溫度的時間大約要12小時。
4、培養箱在使用時，增濕盤內不能缺水（需要蒸餾水或超濾水）。
5、培養箱在使用時，開門時間要盡量短，關門時先將玻璃門關好。
二氧化碳培養箱其廣泛應用于細胞、組織培養和某些特殊微生物的培養，常見于細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產、培養雜交瘤細胞生產抗體、體外授精（IVF）、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領域。