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什么是實(shí)時(shí)熒光定量PCR?
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技術(shù)，簡(jiǎn)稱qPCR,是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì)(熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
與普通PCR相比，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍。運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、絕對(duì)定量和定性分析。
實(shí)驗(yàn)流程：
在實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中，可以分為樣本采集，RNA提取，RNA質(zhì)量鑒定，反轉(zhuǎn)錄及數(shù)據(jù)分析幾個(gè)步驟，在進(jìn)行引物、模板的稀釋，試劑的配制和補(bǔ)足反應(yīng)體系時(shí)都會(huì)用到水，水質(zhì)量的好壞直接影響最終數(shù)據(jù)分析的結(jié)果。
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